Відкритий у Луцьку в серпні 1993 року. Це єдиний в Україні музей, який представляє самобутню регіональну школу волинського іконопису. Збірка музею нараховує понад 600 ікон XVI-XIX ст., предмети металопластики (шати ікон, церковне начиння, іконки), декоративну різьбу (царські врата, кіоти ікон) та скульптуру. Безцінною перлиною збірки є Холмська Чудотворна ікона Божої Матері, унікальна пам’ятка візантійського мистецтва ХІ-ХІІ ст., одна з найшанованіших християнських святинь.
У червні 2001 року до 10-ї річниці незалежності України була створена розширена експозиція Музею волинської ікони в новому приміщенні. У залах музею експонується біля 100 творів іконопису XVI-XVIII ст. Канонічністю, строгістю композицій та віртуозністю виконання відзначений монументальний образ «Спаса у славі» середини XVI ст., що є одним із кращих зразків такого іконографічного типу